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熒光抗體操作過(guò)程為何要避光?

更新時(shí)間:2022-11-12  |  點(diǎn)擊率:958
  熒光抗體操作過(guò)程為何要避光?
 
  (1)生物化學(xué)反應(yīng)需要酶的催化作用,所以熒光素在熒光素酶和ATP等物質(zhì)的參與下可進(jìn)行反應(yīng)發(fā)出熒光.ATP是生命活動(dòng)能量的直接來(lái)源,發(fā)光強(qiáng)度與ATP的含量成正比,所以根據(jù)發(fā)光強(qiáng)度可以計(jì)算出生物組織中ATP的含量。
 
  (2)影響酶活性的外界因素有溫度和pH,其中維持溶液pH的相對(duì)穩(wěn)定時(shí)常常使用緩沖液.分光光度計(jì)反應(yīng)室內(nèi)發(fā)生的能量轉(zhuǎn)換是ATP中活躍的化學(xué)能轉(zhuǎn)化為光能。
 
  (3)熒光素酶濃度不同,但發(fā)光強(qiáng)度相同,由于受ATP數(shù)量限制,發(fā)光強(qiáng)度也不再增加。
 
  (4)每個(gè)細(xì)菌細(xì)胞中ATP的含量大致相同且相對(duì)穩(wěn)定,可以根據(jù)樣品中細(xì)菌的ATP總含量,測(cè)算出細(xì)菌的數(shù)量。
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